Prerequisiti
Cellula procariotica, enzimi di restrizione, vettori di espressione, sintesi proteica, struttura proteine.

Obiettivi formativi
Conoscere e sperimentare le principali tecniche di biochimica utilizzate nella identificazione e caratterizzazione delle proteine quali l’elettroforesi su gel di poliacrillammide.

Descrizione
I campioni della proteina ß-galattosidasi precedentemente purificati mediante cromatografia di affinità, contenenti differenti concentrazioni di proteina sono caricati su gel di poliacrilammide.  Dopo colorazione del gel è possibile evidenziare le diverse concentrazioni di proteina ottenute durante la purificazione e confrontarle con l’estratto totale contenente molte delle proteine espresse dal batterio. 

Conclusioni
L’SDS-PAGE (elettroforesi su gel di poliacrilammide in presenza di dodecil solfato di sodio) è il tipo di elettroforesi più utilizzato in biochimica, in quanto permette di stabilire con buona accuratezza sia il grado di purezza della proteina purificata sia il suo peso molecolare. La tecnica è complessa e richiede esperienza in chi la applica, ma è indispensabile per monitorare quante proteine sono presenti nelle varie fasi di purificazione di un preparato.